תוֹכֶן
- מהו בדיקת קריוטיפ?
- מצבים שאובחנו בבדיקת קריוטיפ
- מתי זה נעשה
- שלבים מעורבים
- 1. אוסף לדוגמא
- 2. הובלה למעבדה
- 3. הפרדת התאים
- 4. גידול תאים
- 5. סנכרון תאים
- 6. שחרור הכרומוזומים מהתאים שלהם
- 7. מכתים את הכרומוזומים
- 8. ניתוח
- 9. ספירת כרומוזומים
- 10. מיון כרומוזומים
- 11. מסתכלים על המבנה
- 12. התוצאה הסופית
- גבולות בדיקת קריוטיפ
מהו בדיקת קריוטיפ?
קריוטיפ הוא תצלום של הכרומוזומים בתא. ניתן לקחת קריוטיפים מתאי דם, מתאי עור עובריים (ממי השפיר או מהשליה), או מתאי מוח עצם.
מצבים שאובחנו בבדיקת קריוטיפ
ניתן להשתמש בקריוטיפים לצורך בדיקה ואישור של הפרעות כרומוזומליות כגון תסמונת דאון ותסמונת עין החתול, וישנם מספר סוגים שונים של הפרעות העשויות להתגלות.
הפרעות כרומוזומליות:
- טריזומיות בהן יש שלושה עותקים של אחד הכרומוזומים ולא שניים
- מונוסומיות בהן קיים רק עותק אחד (במקום שניים)
- מחיקות כרומוזומים בהן חסר חלק מכרומוזום
- טרנסלוקציות כרומוזומים בהן חלק מכרומוזום אחד מחובר לכרומוזום אחר (ולהיפך בתעתיקים מאוזנים).
דוגמאות לטריסומיות כוללות:
- תסמונת דאון (טריזומיה 21)
- תסמונת אדוארד (טריזומיה 18)
- תסמונת פטאו (טריזומיה 13)
- תסמונת קלינפלטר (XXY וריאציות אחרות) - תסמונת קלינפלטר מופיעה אצל 1 מכל 500 גברים שזה עתה נולדו
- תסמונת טריפל איקס (XXX)
דוגמה למונוזומיה כוללת:
- תסמונת טרנר (X0) או מונוזומיה X - בערך 10% מההפלות בשליש הראשון נובעות מתסמונת טרנר, אך מונוזומיה זו קיימת רק בכ -1 מתוך 2,500 לידות נשים חיות.
דוגמאות למחיקות כרומוזומליות כוללות:
- תסמונת קרי-דו-צ'ט (חסר כרומוזום 5)
- תסמונת וויליאמס (חסר כרומוזום 7)
טרנסלוקציות - ישנן דוגמאות רבות של טרנסלוקציות, כולל תסמונת טרנסלוקציה דאון. טרנסקלוקציות רוברטסוניות נפוצות למדי, ומופיעות אצל בערך 1 מכל 1000 אנשים.
פסיפס הוא מצב שבו לחלק מהתאים בגוף יש חריגה כרומוזומלית ואילו לאחרים אין. לדוגמא, תסמונת דאון פסיפס או טריזומיה של פסיפס 9. טריזומיה מלאה 9 אינה תואמת את החיים, אך טריזומיה פסיפס 9 עלולה לגרום ללידה חיה.
מתי זה נעשה
ישנם מצבים רבים בהם רופא שלך יכול להמליץ על קריוטיפ. אלה עשויים לכלול:
- תינוקות או ילדים הסובלים ממצבים רפואיים המעידים על חריגה כרומוזומלית שטרם אובחנה.
- מבוגרים הסובלים מסימפטומים המעידים על חריגה כרומוזומלית (למשל, גברים עם מחלת קלינפלטר עשויים לעבור לא מאובחנים עד גיל ההתבגרות או הבגרות.) חלק מהפרעות הטריזומיה בפסיפס עשויות גם שלא להתאבחן.
- אי פוריות: ניתן לעשות קריוטיפ בגין פוריות. כפי שצוין לעיל, חלק מהפרעות הכרומוזומליות עשויות שלא להיות מאובחנות עד לבגרותן. אישה הסובלת מתסמונת טרנר או גבר עם אחת מהווריאציות של קלינפלטר עשויים שלא להיות מודעים למצב עד שהם מתמודדים עם פוריות.
- בדיקות טרום לידתי: במקרים מסוימים, כגון תסמונת דאון טרנסלוקציה, המצב עלול להיות תורשתי והורים יכולים להיבדק אם ילד נולד עם תסמונת דאון. (חשוב לציין שלרוב תסמונת דאון אינה הפרעה תורשתית אלא מוטציה מקרית).
- לידת מת: קריוטיפ נעשה לעתים קרובות כחלק מהבדיקות בעקבות לידת מת.
- הפלות חוזרות: קריוטיפ של ההפלות החוזרות על ידי ההורה עשוי לתת רמזים לסיבות להפסדים החוזרים ונשנים הללו. חושבים כי הפרעות כרומוזומליות, כגון טריזומיה 16, הן הגורם ללפחות 50% מההפלות.
- לוקמיה: בדיקת קריוטיפ עשויה להיעשות גם כדי לסייע באבחון לוקמיה, למשל, על ידי חיפוש כרומוזום פילדלפיה שנמצא אצל אנשים הסובלים מסרטן דם מיאלוגני כרוני או לוקמיה לימפוציטית חריפה.
שלבים מעורבים
בדיקת קריוטיפ עשויה להישמע כמו בדיקת דם פשוטה, שגורמת לאנשים רבים לתהות מדוע לוקח כל כך הרבה זמן להגיע לתוצאות. בדיקה זו למעשה מורכבת למדי לאחר האיסוף. בואו נסתכל על הצעדים האלה כדי שתוכלו להבין מה קורה בזמן שאתם מחכים למבחן.
1. אוסף לדוגמא
השלב הראשון בביצוע קריוטיפ הוא איסוף מדגם. בילודים נאספת דגימת דם המכילה כדוריות דם אדומות, כדוריות דם לבנות, סרום ונוזלים אחרים. קריוטיפ ייעשה על תאי הדם הלבנים המתחלקים באופן פעיל (מצב המכונה מיטוזה). במהלך ההריון, הדגימה יכולה להיות מי שפיר שנאספו במהלך בדיקת מי שפיר או חתיכת השליה שנאספה במהלך בדיקת דגימת וילי כוריונית (CVS). מי השפיר מכילים תאי עור עובריים המשמשים ליצירת קריוטיפ.
2. הובלה למעבדה
קריוטיפים מבוצעים במעבדה ספציפית הנקראת מעבדה ציטוגנטית - מעבדה החוקרת כרומוזומים. לא בכל בתי החולים יש מעבדות ציטוגנטיקה. אם בבית החולים או במתקן הרפואי שלך אין מעבדת ציטוגנטיקה משלה, דגימת הבדיקה תישלח למעבדה המתמחה בניתוח קריוטיפ. מדגם הבדיקה מנותח על ידי טכנולוגים ציטוגנטיים שהוכשרו במיוחד, Ph.D. ציטוגנטיקאים, או גנטיקאים רפואיים.
3. הפרדת התאים
על מנת לנתח כרומוזומים, על המדגם להכיל תאים המתחלקים באופן פעיל. בדם תאי הדם הלבנים מתחלקים באופן פעיל. רוב תאי העובר מתחלקים באופן פעיל גם כן. ברגע שהדגימה מגיעה למעבדת הציטוגנטיקה, התאים שאינם מתחלקים מופרדים מהתאים המפרידים באמצעות כימיקלים מיוחדים.
4. גידול תאים
על מנת שיהיו מספיק תאים לניתוח, התאים המפרידים גדלים במדיה מיוחדת או בתרבית תאים. מדיה זו מכילה כימיקלים והורמונים המאפשרים לתאים להתחלק ולהתרבות. תהליך טיפוח זה יכול לארוך שלושה עד ארבעה ימים עבור תאי הדם, ועד שבוע עבור תאי העובר.
5. סנכרון תאים
כרומוזומים הם מחרוזת ארוכה של DNA אנושי. על מנת לראות כרומוזומים במיקרוסקופ, הכרומוזומים צריכים להיות בצורתם הקומפקטית ביותר בשלב של חלוקת תאים (מיטוזה) המכונה מטאפאזה. על מנת להביא את כל התאים לשלב ספציפי זה של חלוקת התאים, מטפלים בתאים בכימיקל העוצר את חלוקת התאים בנקודה שבה הכרומוזומים הם הקומפקטיים ביותר.
6. שחרור הכרומוזומים מהתאים שלהם
על מנת לראות את הכרומוזומים הקומפקטיים הללו במיקרוסקופ, הכרומוזומים צריכים להיות מחוץ לתאי הדם הלבנים. זה נעשה על ידי טיפול בתאי הדם הלבנים בתמיסה מיוחדת שגורמת להם להתפוצץ. זה נעשה בזמן שהתאים נמצאים בשקופית מיקרוסקופית. שאריות הפסולת מכדוריות הדם הלבנות נשטפות ומשאירות את הכרומוזומים תקועים למגלשה.
7. מכתים את הכרומוזומים
כרומוזומים הם באופן טבעי חסרי צבע. על מנת לספר כרומוזום אחד לאחר, מוחל על השקופית צבע מיוחד בשם צבע ג'ימסה. צבע ג'ימסה מכתים אזורים של כרומוזומים העשירים בבסיסי אדנין (A) ותימין (T). כאשר הם מוכתמים, הכרומוזומים נראים כמו מיתרים עם רצועות בהירות וכהות. לכל כרומוזום יש דפוס ספציפי של רצועות בהירות וכהות המאפשרים לציטוגנטיקה לספר כרומוזום אחד לאחר. כל פס כהה או בהיר כולל מאות גנים שונים.
8. ניתוח
לאחר הכרומוזומים מוכתמים, השקופית מוכנסת למיקרוסקופ לניתוח. לאחר מכן מצטלמת הכרומוזומים. עד סוף הניתוח ייקבע המספר הכולל של הכרומוזומים והכרומוזומים יסודרו לפי גודל.
9. ספירת כרומוזומים
השלב הראשון של הניתוח הוא ספירת הכרומוזומים. לרוב בני האדם 46 כרומוזומים. לאנשים עם תסמונת דאון 47 כרומוזומים. כמו כן, לאנשים יהיה חסר כרומוזומים, יותר מכרומוזום נוסף אחד, או חלק מכרומוזום שהוא חסר או משוכפל. על ידי התבוננות במספר הכרומוזומים בלבד ניתן לאבחן מצבים שונים כולל תסמונת דאון.
10. מיון כרומוזומים
לאחר קביעת מספר הכרומוזומים, הציטוגנטיקאי יתחיל למיין את הכרומוזומים. כדי למיין את הכרומוזומים, ציטוגנטיקאי ישווה את אורך הכרומוזום, את מיקום הצנטרומרים (האזורים שבהם מחברים את שני הכרומטידים) ואת המיקום וגדלי רצועות ה- G. זוגות הכרומוזומים ממוספרים מהגדול ביותר (מספר 1) לקטן ביותר (מספר 22). ישנם 22 זוגות כרומוזומים, המכונים אוטוזומים, המתאימים בדיוק. ישנם גם כרומוזומי המין, לנקבות יש שני כרומוזומי X ואילו לזכרים יש X ו- Y.
11. מסתכלים על המבנה
בנוסף לבדיקת המספר הכולל של הכרומוזומים וכרומוזומי המין, הציטוגנטיקאי יסתכל גם על מבנה הכרומוזומים הספציפיים כדי לוודא שאין חסר חומר נוסף או הפרעות מבניות כמו טרנסלוקציות. טרנסלוקציה מתרחשת כאשר חלק מכרומוזום אחד מחובר לכרומוזום אחר. במקרים מסוימים, שתי חלקי כרומוזומים מוחלפים (טרנסלוקציה מאוזנת) ובפעמים אחרות מתווספת פיסה נוספת או חסרה מכרומוזום אחד בלבד.
12. התוצאה הסופית
בסופו של דבר, הקריוטיפ הסופי מראה את המספר הכולל של הכרומוזומים, המין וכל הפרעות מבניות עם כרומוזומים בודדים. נוצרת תמונה דיגיטלית של הכרומוזומים כאשר כל הכרומוזומים מסודרים לפי מספר.
גבולות בדיקת קריוטיפ
חשוב לציין שאמנם בדיקות קריוטיפ יכולות לספק מידע רב על כרומוזומים, אך בדיקה זו אינה יכולה לספר לך האם קיימות מוטציות גנטיות ספציפיות, כגון אלו הגורמות לציסטיק פיברוזיס. היועץ הגנטי שלך יכול לעזור לך להבין גם מה בדיקות קריוטיפ יכולות לספר לך וגם מה לא. יש צורך במחקרים נוספים כדי להעריך את התפקיד האפשרי של מוטציות גנטיות במחלות או הפלות.
חשוב גם לציין כי לעיתים בדיקות קריוטיפ אינן מסוגלות לאתר כמה חריגות כרומוזומליות, כמו למשל כאשר קיימת פסיפס שליה.
נכון לעכשיו, בדיקת קריוטיפ במסגרת טרום לידתי היא פולשנית למדי, ודורשת בדיקת מי שפיר או דגימת וילה כוריונית. עם זאת, הערכת DNA ללא תאים בדגימת הדם של האם שכיחה כיום כחלופה הרבה פחות פולשנית לאבחון טרום לידתי של הפרעות גנטיות בעובר.
מילה מ- Wellwell
בזמן ההמתנה לתוצאות הקריוטיפ שלך, אתה עלול להרגיש חרדה רבה, והשבוע-שבועיים שנדרש כדי להשיג תוצאות יכולים להרגיש כמו עידנים. קח את הזמן כדי להישען על החברים והמשפחה שלך. למידה על חלק מהתנאים הקשורים לכרומוזומים חריגים עשויה גם להועיל. אף על פי שרבים מהמצבים המאובחנים עם קריוטיפ עלולים להיות הרסניים, ישנם אנשים רבים החיים עם מצבים אלו בעלי איכות חיים מעולה.